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1.实验必备(以下器材/试剂必须全部准备齐全才可以开始操作)Frdbio单抗融合器材/试剂准备表器械名称数量备齐打√器械名称数量...
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1. 杂交瘤融合细胞铺板培养1.1 96孔板液体培养1.1.1用排枪将重悬后的细胞均匀铺入96细胞培养板,200μl/孔(若饲养细胞已提前铺...
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1. 培养基的配制第一次亚克隆,一般用HT完全培养基(含1×HT和20%胎牛血清的1640完全培养基),配制方法:20%胎牛血清+1%双抗(链...
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1. 细胞株的冻存:杂交瘤细胞冻存是单抗中重要环节。1.1 将处于对数生长期的杂交瘤细胞重悬起来,1,500rpm离心5min,去除上清。1...
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1. 单克隆抗体的生产目前最常见的单克隆抗体生产主要是细胞培养发酵法和小鼠腹水生产法;细胞发酵生产法由于受到实验条件和生产...
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单克隆抗体经过几次亚克隆之后需要对亚型进行鉴定,鉴定之后对其理化性质更为熟悉,便于下游纯化和抗体保存和使用,小鼠抗体亚型...
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抗体的纯化方法很多,最为常用的为以下四种方法,基于工业化生产工艺开发的规模化生产方法要比这些复杂得多,甚至多个纯化策略联...
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关于硬件1.购买的Balb/c小鼠种系要纯正,来源可靠,不要为了省钱自养自繁(有老鼠自繁生产能力单位除外)。2017年11月13日《自然...
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Protein A具有和IgG的Fc片段结合的活性。Protein A能与大部分哺乳动物的IgG反应,不同属种的抗体对Protein A的亲和力不同;据此可...
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1.纯度问题作为抗原,其纯度越高抗体的下游制备工艺会越简单:对于多抗来说,高免血清中针对目抗原的抗体分子越多更容易得到效价...
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1. 抗原(抗体/蛋白)特异性亲和柱制备1.1 含氨基配体特异性亲和柱的制备1.1.1 称取0.3 g溴化氰活化的琼脂糖凝胶(CNBr-activated ...
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1. 将鸡蛋敲个小洞,将注射器插入蛋黄中吸取蛋黄。2. 将蛋黄1:9用超滤水稀释,用稀盐酸调pH到5.2。3. 4℃过夜,待其自然分层,吸...
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抗体纯化后,一般将其缓冲液置换成PBS,便于后期标记或其他用途使用,如果浓度太低,需要浓缩,抗体浓缩后浓度最好不要太高,太高...
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随着科技的发展,抗体的应用涉及到很多领域,以下简单介绍与我们科研息息相关的一些应用。1.作为亲和的配体抗体由于其与抗原特异...
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融合标签的切割需要根据不同载体上设计的标签蛋白与目标蛋白之间的蛋白酶切位点选择合适的蛋白酶,福因德生物可以提供优质的蛋白...
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1.表达宿主菌的选择大肠杆菌常用的表达宿主菌有E.ColiBL21(DE3),E.ColiRossatta(DE3),E.ColiBL21(DE3)Condon Plus。针对特殊的目...
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质粒载体是重组蛋白表达的关键工具,其结构如下图。重组蛋白表达,我们首先要将基因插入到表达载体上,插入的位置为多克隆位点。...
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1. 方案设计问题1.1 密码子移位:翻译起始mRNA与插入片段序列形成二级结构,外源基因序列内部有核糖体结合位点、SD序列或者其他...
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科研工作者在进行蛋白表达的时候,最希望能够实现蛋白的可溶性表达;但是,大部分都是包涵体状态。主要原因是在重组蛋白的表达过...
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1.表达工程菌蛋白可溶性表达很大原因取决于二硫键和正确折叠的问题,所以选用利于二硫键形成的宿主菌,如Origami(DE3), Origami ...
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