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Ar.A4感受态细胞
  • 品牌:Frdbio
  • 产地:中国
  • 型号:100ul*10
  • 货号:MCC0101
  • 发布日期: 2023-08-11
  • 更新日期: 2024-04-30
产品详请
产地 中国
品牌 Frdbio
货号 MCC0101
用途范围 科研使用
规格 100ul*10
是否进口

Ar.A4感受态细胞

产品编号

产品名称

规格

MCC0101

Ar.A4感受态细胞

100μl*10

保存条件:-80

1.产品简介:

  Agrobacterium rhizogenes(kanR ) Ar A4 Ri(agropinetype)

发根农杆菌是根瘤菌科(Rhizobiaceae)农杆菌属(agrobacterium)的一种革兰氏阴性土壤细菌,它能够感染大多数双子叶植物和少数单子叶植物以及个别裸子植物。Ar.A4发根农杆菌菌株含有农杆碱型Ri质粒,具有广泛的宿主范围(玉米,烟草,胡萝卜,甘草等),同时具有卡那霉素抗性。Ar.A4化学转化感受态细胞经特殊工艺制作,pK7WGF2质粒(壮观霉素抗性)检测,转化效率>104 cfu/μgDNA

2.使用说明:

1).-80℃保存的Ar.A4发根农杆菌感受态于室温或手心片刻待其部分融化,处于冰水混合状态时插入冰中。

2). 100μl感受态加入0.01-1 μg质粒DNA(转化效率较高, 次使用前 做预实验确定所加质粒的量),用手快速、剧烈拨打管底混匀或用枪吹吸混匀,依次放于冰中静置5分钟、液氮5分钟、37℃水浴5分钟、冰浴5分钟。

3). 冰浴中拿出放室温,加入700μ无抗生素的TY液体培养基,于28℃振荡培养2小时。

4). 6000 rpm 离心一分钟收菌,留取100 μl左右上清轻轻吹打重悬菌块涂布于含相应抗生素的TY平板上,倒置放于28℃培养箱培养2-3 天。

3.注意事项:

1). 加入质粒时体积不应大于感受态体积的1/10;质粒不纯或存在乙醇等有机物污染,转化效率急剧下降;质粒增大一倍,转化效率下降一个数量级。

2). 混匀质粒时应用手指快速拨打管底或用枪吹吸混匀,务必使质粒快速、均匀分散开,与感受态细胞充分接触。转化高浓度的质粒可相应减少最终用于涂板的菌量。

3). 平板上阳性克隆密度过大时,由于营养不足,阳性克隆生长变慢,菌落变小,为了获得大的菌落,应减少质粒用量或降低涂板的菌量。

4). Ar.A4具有卡那霉素抗性,不可用于具有卡那霉素抗性质粒的转化。

*本试剂仅供实验室研究使用