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产品分类
JM109(DE3) 感受态细胞
JM109(DE3) 感受态细胞
物品单位 品牌
Frdbio
  • 产地:中国
  • 型号:100ul*10
  • 货号:MCC0113
  • 发布日期: 2022-09-15
  • 更新日期: 2023-02-03
产品详细说明
产地 中国
品牌 Frdbio
货号 MCC0113
用途范围 科研使用
纯度 %
CAS编号
规格 100ul*10
是否进口

JM109(DE3) 感受态细胞

产品编号

产品名称

规格

MCC0113

JM109(DE3) 感受态细胞

100μl*10

保存条件:-80℃。

1.产品简介:

JM109(DE3)菌株来源于JM109,用于高效表达克隆于含有噬菌体T7启动子的表达载体(如pET系列)的基因。λ噬菌体DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶,该区整合于JM109的染色体上,所以称为JM109(DE3)。

基因型:endA1 recA1 gyrA96 thi-1 hsdR17 (rk-,mk+)relA1supE44D(lac-proAB) [F? traD36 proAB laqI qZΔM15](DE3)

特点:可同时表达T7 RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,用于pET系列,pGEX,pMAL等质粒的蛋白表达。JM109(DE3)菌株不可用于蓝白斑筛选试验。JM109(DE3)感受态细胞由特殊工艺制作,pUC19质粒检测转化效率高于108 cfu /μg DNA。

2.使用说明:

1.取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min。
3.42℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。
4.每个离心管中加入450 μl无菌的2YT或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床, 150 rpm振荡培养45~60min使菌体复苏。
5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的2YT或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12~16h。

3.注意事项:

1.刚化冻的细胞转化效率 ,避免反复化冻。

2.整个动作要轻柔。

3.质粒质量和浓度等的差异会使转化效率有所下降。

*本试剂仅供实验室研究使用