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产品分类
FrdbioR AutoExp原核表达培养基
FrdbioR AutoExp原核表达培养基
物品单位 品牌
Frdbio
  • 产地:中国
  • 货号:PER0020
  • 发布日期: 2020-07-20
  • 更新日期: 2020-07-20
产品详细说明
产地 中国
品牌 Frdbio
货号 PER0020
用途范围
纯度 %
CAS编号
规格
是否进口

FrdbioR AutoExp原核表达培养基

1包装清单:

产品编号名称规格特性
PER0020AutoExp原核培养基20 ml/100 ml/ 500 ml无需IPTG诱导,蛋白即可自动大量表达



2保存条件:本品置于-20℃保存有效期1年。冷冻保存后出现微量沉淀为正常现象,不影响效果。

3.产品简介:

FrdbioRAutoExpFrdbio公司推出的新型蛋白诱导表达培养基组分。大肠杆菌表达菌株在含AutoExp的培养基中生长到对数后期能够开始自行大量表达目的蛋白。与传统的IPTG诱导相比,使用AutoExp进行蛋白诱导具有以下优势:1)表达量高,是传统IPTG法诱导量的数倍;2)操作简单,省却了对菌体浓度、IPTG用量及诱导时间的优化;3)重复性好,不同批次的蛋白诱导情况稳定。

4.适用范围

能用IPTG诱导蛋白表达的大肠杆菌菌株。

5.使用方法

l   将表达质粒转化表达宿主,挑取转化子于含有相应抗生素的2 ml 含0.8% LB液体培养基中活化培养。活化培养基中添加葡萄糖可防止蛋白渗漏表达并造成细胞毒性。

l   在每个含50 ml LB培养基的三角瓶中(容积为250 ml)加入2 ml AutoExp,并添加合适浓度的抗生素。

l   向三角瓶中接种0.2 ml新鲜活化的菌液

l   将三角瓶用干燥滤纸片封口,置于37 ℃恒温摇床培养,转速设为200 rpm。

l   培养菌体至饱和(约12-15小时)后收集细胞,随即进行细胞破碎和蛋白纯化。

6.注意事项

l   不要在培养基中添加额外成分,也不要改变菌体生长温度、缩短菌体生长时间,否则目的蛋白可能无法被正常诱导。

l   为达到*的蛋白诱导量,培养过程中应使培养液具有足够的通气量,因此三角瓶中培养基的量不可过多,瓶口应用通气性良好的滤纸封闭,且培养时摇床的转速不可过低。

l   许多情况下50 ml经AutoExp诱导的菌液可表达高至5~20 mg的目的蛋白。但对于少数毒性蛋白,AutoExp的诱导量会较低。

l   平均而言,AutoExp诱导与IPTG诱导得到的蛋白在可溶性方面相当。

 

7.附注

l   LB培养基配制方法:称取10 g tryptone,5 g yeast extract,5 g NaCl,加水溶解,定容至1 L,然后按每瓶50 ml分装至容积为250 ml的三角瓶中,置于121℃灭菌30 min。

 

*本试剂仅供实验室研究使用