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Frdbio®别藻蓝蛋白抗体快速标记试剂盒
Frdbio®别藻蓝蛋白抗体快速标记试剂盒
物品单位 品牌
Frdbio
  • 产地:中国
  • 货号:ARL0023k-1
  • 发布日期: 2020-06-23
  • 更新日期: 2020-06-23
产品详细说明
产地 中国
品牌 Frdbio
货号 ARL0023k-1
用途范围
纯度 %
CAS编号
规格
是否进口

产品介绍:

别藻蓝蛋白(Allophycocyanin ,APC)是一种从红藻中提纯的高亮度藻胆蛋白,属于远红色荧光,具有很高的量子产量。激光594 nm和633 nm处激发其发光,在650 nm处吸收峰*,在660 nm处荧光发射峰*。APC比普通的化学发光强100倍,在普通应用中,其至少可以提高灵敏度5-10倍,主要用于流式细胞术、微阵列分析、ELISAs等。APC主要优点是发射长波荧光,抗淬灭性强,高水溶性,均质结构,分子量确定。

基本原理:

本试剂盒利用抗体和APC上游离的氨基,采用定向对接偶联技术将抗体分子与APC共价偶联,主要特点:

ü  试剂盒组分齐全,操作简单,只要按照操作步骤进行便可得到高品质APC偶联抗体;

ü  本试剂盒所配置的APC为高纯度,高活性荧光蛋白,荧光发光效率更高;

ü  本试剂采用定向偶联技术,荧光蛋白和抗体都不会发生自连,保证偶联物的特异性和均一性;

ü  试剂盒所使用的交联剂增加了延长臂,确保不会因为蛋白质位阻而影响发光效率;

ü  鉴于APC的蛋白骨架特性,其抗淬灭能力更强。

                                              

试剂盒已经提供材料:

ü  活化APC蛋白         1mg  可用于标记0.5mg抗体

ü  标记缓冲液           30ml

ü  抗体修饰试剂         2mg*1支(临用前加1ml水)

ü  30KMWCO超滤管        2支

ü  封闭试剂             2mg*1支 使用时加DMSO 200ul

ü  DMSO溶剂            1ml*1支

ü  说明书               1份

其他需要自备试剂材料:

2  待标记的生物分子;

2  移液器及吸头;

2  去离子水。

试剂盒储存

试剂盒抗体修饰试剂放在-20?C,其余组分放在2-8可保存6个月以上。

试剂盒操作流程:

1.抗体的修饰

1抗体修饰试剂溶解于ddH2O配制成2mg/ml的抗体修饰试剂溶液

2)取待标记抗体(纯度>90%),浓度调整到 5mg/ml以上为宜,按照每毫克抗体加入5μl 抗体修饰试剂溶液,轻轻混匀,在室温下搅拌反应 60-90分钟。

 

2.活化APC蛋白与抗体偶联

1)用标记缓冲液复溶活化APC蛋白,浓度调整为5mg/ml

2)将修饰抗体活化APC蛋白,按照质量比1:2比例(每毫克修饰抗体对应2毫克活化APC蛋白)混合,室温避光反应2小时;

3)将封闭试剂管中加入200ul DMSO,配置成10mg/ml封闭试剂溶液;按照每毫克抗体3.4ul的体积加入步骤2)反应产物中,封闭未反应完的活性基团;

4)标记好的抗体分装,加入适当保护剂,-20保存备用。

注意事项:

1)本试剂盒中抗体修饰试剂为高活性试剂,请-20 保存;其余成份2-8℃保存、勿冻存。

2)试剂盒组份在运输过程中可能造成颠倒,会使液体或干粉试剂粘到管壁或瓶盖上。使用前请离心处理,以使附着管壁或瓶盖的液体或干粉试剂沉积到管底。

3)本试剂盒中活化APC蛋白需要避光低温保存,一旦复溶请一次性使用完;标记过程尽量保证其避光;

4)封闭剂需现用现配,干粉溶解后不能长期保存;

5)使用本试剂盒标记抗体,其抗体特异性要高,纯度不低于90%,*使用单克隆抗体,溶液环境不含游离氨基,*为PBS溶液;标记前抗体需去除NaN3和BSA,抗体的透析、浓缩和浓度测定等操作都会造成抗体量的损失,因此标记前准备抗体时需根据具体情况考虑最适的抗体量;

6)由于抗体修饰后所带的基团容易被重新氧化,因此修饰后抗体需尽快与活化的APC进行偶联;

7)本试剂盒中的超滤管为特殊处理的,可有效避免荧光淬灭和蛋白吸附损失,市面超滤管可能会对标记效率造成影响。

8)本试剂盒中部分试剂为高活性试剂,对皮肤和身体有一定的危害,请全程戴手套操作;DMSO属微毒类,对人体皮肤有渗透性,对眼有刺激作用,使用时避免与皮肤、眼睛和粘膜接触。

 

更多信息,请垂询我们的技术支持  QQ:657047932