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ArcticExpress(DE3)RP感受态细胞
  • 品牌:Frdbio
  • 产地:中国
  • 货号:MCC0095
  • 发布日期: 2020-05-30
  • 更新日期: 2024-02-26
产品详请
产地 中国
品牌 Frdbio
货号 MCC0095
纯度 %
规格 100μl*10

ArcticExpress(DE3)RP感受态细胞

产品编号

产品名称

规格

MCC0095

ArcticExpress(DE3)RP 感受态细胞

100μl*10

pUC19control vector

10pg/μl10μl

保存条件:-80℃。

1.产品简介:

本产品是采用大肠杆菌ArcticExpress(DE3)RP感受态细胞菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。ArcticExpress细胞可以解决细菌基因表达中常见的蛋白质不溶解障碍。

基因型:E.coliBF–ompThsdS(rB–mB–) dcm+ Tetr gal λ(DE3) endAHte [cpn10 cpn60 Gentr] [argUproLStrr]

特点:1ArcticExpress(DE3)RP衍生自高性能BL21-Gold感受态细胞,在被改造后拥有了许多额外的基因片段,这些片段可以表达出那些稀有的tRNA,使异源蛋白质在大肠杆菌中高效高水平地表达。2.可以表达对低温适应的伴侣蛋白Cpn10Cpn60(来自于嗜冷菌,Oleispiraantarctica)。3.提高富含GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。无论是使用DE3溶素原菌株的T7启动子,或可诱导的IPTG,还是使用非DE3溶素原菌株的非T7启动子,ArcticExpress菌株都可用于重组蛋白的表达。具链霉素抗性。pUC19质粒检测,转化效率可达108cfu/μg DNA

2.使用说明:

1.取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min

342℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。

4.每个离心管中加入450 μl无菌的SOCLB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床, 150 rpm振荡培养4560min使菌体复苏。

5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOCLB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养, 37℃培养12~16h

3.注意事项:

1.刚化冻的细胞转化效率*,避免反复化冻。

2.整个动作要轻柔,质粒质量和浓度等的差异会使转化效率有所下降。

*本试剂仅供实验室研究使用