产地 | 中国 |
品牌 | Frdbio |
货号 | MCC0010 |
用途 | |
包装规格 | 100ul*10 |
纯度 | % |
CAS编号 | |
是否进口 |
E.coli DH5α感受态细胞
产品编号 | 产品名称 | 规格 |
MCC0010 | E.coli DH5α感受态细胞 | 100μl*20 |
保存条件:-80℃。
1.产品简介:
本产品是采用大肠杆菌E.coli DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,实验室最常用的*感受态细胞,转化效率高,可用于蓝白斑筛选。
基因型:F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA
特点:1.DH5α菌株是实验室最常用的感受态细胞。缺失核酸内切酶(endA),提高了质粒 DNA 的产量和质量。2.重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA 的稳定性。3.φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的
β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。DH5α菌株的缺点是生长缓慢,37℃需培 12-14 小时才能看见*。pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg DNA。
2.使用说明:
1.取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。
2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min。
3.42℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。
4.每个离心管中加入450 μl无菌的SOC或LB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150 rpm振荡培养45~60min使菌体复苏。
5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOC或LB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12~16h。
3.注意事项:
1.刚化冻的细胞转化效率*,避免反复化冻。
2.整个动作要轻柔。
*本试剂仅供实验室研究使用