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产品分类
BJ5183-AD-1感受态细胞
BJ5183-AD-1感受态细胞
物品单位 品牌
千克 Frdbio
  • 产地:中国
  • 货号:MCC1210
  • 发布日期: 2020-05-30
  • 更新日期: 2020-07-27
产品详细说明
产地 中国
品牌 Frdbio
货号 MCC1210
用途范围
纯度 %
CAS编号
规格 100ul*10
是否进口

BJ5183-AD-1感受态细胞

产品编号

产品名称

规格

MCC1210

BJ5183-AD-1感受态细胞

100μl*10

保存条件:-80℃。

1.产品简介:

本产品是采用大肠杆菌BJ5183菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,有助于重组DNA的稳定和高纯度DNA的提取,是目前腺病毒系统最常用的感受态细胞。

基因型:endA1 sbcBC recBC galK met thi-1 bioT hsdR (Strr) [pAdEasy-1 (Ampr)]

特点:1BJ5183-AD-1携带了腺病毒质粒pAdeasy-1BJ5183菌株,具有较高重组活力,有利于转入的目的基因与腺病毒质粒的重组。2endA1(缺失核酸内切酶)的突变有利于重组DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。3BJ5183-AD-1菌株细胞中已经提前转入了腺病毒质粒pAdeasy-1[encodes the Adenovirus-5 genome (E1/E3 deleted)],赋予该菌株氨苄抗性,在病毒质粒构建时,只需转入线性化的目的质粒即可,简化了实验步骤,提高了病毒质粒重组概率。其具链霉素抗性,氨苄抗性。pCAMBIA2301质粒(size:1163bp)检测,转化效率可达105 cfu/μgDNA

2使用说明:

1.取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min

342℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。

4.每个离心管中加入450 μl无菌的SOCLB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床, 150 rpm振荡培养4560min使菌体复苏。

5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOCLB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养, 37℃培养12~16h

3注意事项:

1.刚化冻的细胞转化效率*,避免反复化冻。

2BJ5183-AD-1菌株的质粒产量不高。腺病毒构建成功后,可选择在其他大肠杆菌菌株中扩繁,纯化质粒。

*本试剂仅供实验室研究使用