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产品分类
ER2566感受态细胞
ER2566感受态细胞
物品单位 品牌
千克 Frdbio
  • 货号:MCC0026
  • 发布日期: 2020-05-30
  • 更新日期: 2020-07-27
产品详细说明
产地
品牌 Frdbio
货号 MCC0026
用途范围
纯度 %
CAS编号
规格 100ul*10
是否进口

ER2566感受态细胞

产品编号

产品名称

规格

MCC0026

ER2566感受态细胞

100μl*10

保存条件:-80℃。

1.产品简介:

本产品是采用大肠杆菌ER2566感受态细胞菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。是NEB公司开发的具有超高转化效率的蛋白表达原核菌株,能够有效抑制表达的异源蛋白在大肠杆菌体内的降解。

基因型:F-λ-fhuA2[lon]ompTlacZ::T7genegalsulA11Δ(mcrC-mrr)114::IS10R(mcr-73::miniTn10-TetS)2R(zgb-210::Tn10)

(TetS)endA1[dcm]

特点:1Lac启动子启动下游T7RNA聚合酶的表达,可用于T7启动子表达载体(pET系列)的高水平蛋白表达。2fhuA2赋予ER2566菌株对噬菌体T1的抗性。3lonompT蛋白酶缺陷菌株,能够有效防止表达的异源目的蛋白在细菌体内的降解。4.Δ(mcrC-mrr)114mcr-73突变的存在使ER2566菌株无法对外源DNA进行标记、限制,提高了外源甲基化DNA的转化效率。pUC19质粒检测,转化效率可达108cfu/μg DNA

2.使用说明:

1.取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min

342℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。

4.每个离心管中加入450 μl无菌的SOCLB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床, 150 rpm振荡培养4560min使菌体复苏。

5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOCLB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12~16h

3.注意事项:

1.刚化冻的细胞转化效率*,避免反复化冻。

2.质粒质量和浓度等的差异会使转化效率有所下降。

*本试剂仅供实验室研究使用