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Frdbio Dextrin Beads
  • 品牌:Frdbio
  • 产地:中国
  • 货号:PPR0024
  • 发布日期: 2020-08-27
  • 更新日期: 2024-02-26
产品详请
产地 中国
品牌 Frdbio
货号 PPR0024
保存条件 2-8℃
纯度 %
规格 ml
保质期 12个月
是否进口

1.产品简介:

Dextrin Beads 用于纯化带有麦芽糖结合蛋白(MBP)标签蛋白的亲和层析介质。Dextrin Beads可以一步纯化MBP融合蛋白,并通过10mM麦芽糖进行温和洗脱,保护了标签蛋白的活性。如果要去除MBP融合部分可用位点特异性蛋白酶切除。

性能

指标

基质

高度交联的6%琼脂糖微球

配体

糊精

载量(/ml 介质)

>10 mg MBP蛋白(80 kDa)

粒径 (μm)

45-165

*流速

0.3 MPa, 3   bar

pH 稳定范围

3-12

储存缓冲液

20% 乙醇

储存温度

2°C -8°C

2.纯化流程

2.1 缓冲液的准备

所用水和Buffer在使用之前建议用0.22μm 或0.45μm滤膜过滤。

结合/ 洗杂液: 20mM Tris-HCl,200mM NaCl, 1mM EDTA,pH7.4

洗脱液: 20 mM Tris-HCl,1mM EDTA,10mM Maltose,pH7.4

注意: 结合液和洗脱液中可加入1mM DTT或10mM β–巯基乙醇

2.2 样品准备

样品在上样前建议离心或用0.22μm 或0.45μm滤膜过滤,减少杂质,提高蛋白纯化效率和防止堵塞柱子。

2.3 Dextrin Beads装填

析柱的装(使用液器装

1) 用去离子水冲洗析柱底,确保柱底板上无泡,关闭柱底出口,在柱底部留出1-2cm的去离子水。

2) 将树浮起,小心的将浆连续地倒入析柱中。用玻璃棒沿着柱壁倒入液可泡的生。

3) 如果使用液器,立即在析柱和液器中加水,将进样分配器放置于液表面,接至上,避免在分配器或进样管中泡。

4) 开层析柱底部出口,,使其在定的流速下行。最初应让缓冲液慢流过层析柱,然后慢增加至最流速,这样可避免液压对所形成柱床的冲,也可以避免柱床形成的不均。如果不到推荐的力或流速,可以用所使用的*流速,这样也可以得到一很好的装效果。(注意:在后的色程序中,不要超*装柱流速的75%柱床高度定后,在*的装柱流速下至少再上3倍柱床体的去离子水。上柱床高度。

5) 关闭泵关闭层析柱出口。

6) 如果使用液器,去除液器,分配器至于析柱中。

7) 分配器推向柱子至标记的柱床高度。允装柱液入分配器,锁紧分配器接

8) 好的析柱接至或色中,始平衡。如果需要可以重新整分配器

2.4 

1) Dextrin Beads装入合适的析柱析用倍柱体行平衡,使目的蛋白相同的冲体系下,起到保蛋白的作用。

2) 将样品加到平衡好的Dextrin Beads(保目的蛋白Dextrin Beads充分接,提高目的蛋白的回收率),收集流出液。

3) 用10-15倍柱体洗,去除非特性吸附的白,收集洗液。

4) 使用5-10倍柱体脱液,收集洗液,即目的蛋白分。

5) 依次使用3倍柱体合液和5倍柱体的去离子水平衡料,*再用5倍柱体20%的乙醇平衡,然后保存在等体20%的乙醇中,置于4度保存,防止料被染。

2.5 SDS-PAGE检测

使用品得到的品(包括流出分、洗杂组分和洗脱组分)以及原始品使用SDS-PAGE检测纯化效果

3. 填料清洗

Dextrin Beads品可以重使用而无需再生,但着非特合的蛋白的增多和蛋白的聚集,往往造成流速和量都下降,这时可按照下面方法对树洗。

3倍柱体积的去离子水;

3倍柱体积的0.1% SDS或0.5M NaOH溶液;

3倍柱体积去离子水,20%乙醇4-30度保存。

4.关产

货号

Frdbio Dextrin Beads

PPR0024

10ml/25ml/100ml

Frdbio Dextrin   Beads Kit

PPR0024K

1ml/1mlX5

Frdbio Ni-NTA   Beads

PPR0011

10ml/25ml/100ml

Frdbio Ni-NTA Beads Kit

PPR0011K

1ml/1mlX5

Frdbio Co-NTA Beads

PPR0012

10ml/25ml/100ml

Frdbio Co-NTA Beads Kit

PPR0012K

1ml/1mlX5

Frdbio Cu-IDA Beads

PPR0013

10ml/25ml/100ml

Frdbio Cu-IDA Beads Kit

PPR0013K

1ml/1mlX5

Frdbio Zn-IDA   Beads

PPR0014

10ml/25ml/100ml

Frdbio Zn-IDA   Beads Kit

PPR0014K

1ml/1mlX5

Frdbio Glutathione Beads

PPR0021

10ml/25ml/100ml

Frdbio Glutathione Beads Kit

PPR0021K

1ml/1mlX5