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E.coli Origami 2(DE3) 感受态细胞
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  • 发布日期: 2020-05-30
  • 更新日期: 2020-07-27
产品详细说明
品牌: Frdbio CAS编号:
产地: 中国 货号: MCC0061
纯度: % 用途范围:
规格: 100μl*10 是否进口:

E.coli Origami 2(DE3) 感受态细胞

产品编号

产品名称

规格

MCC0061

E.coli Origami 2(DE3) 感受态细胞

100μl*10

pUC19control vector

10pg/μl10μl

  保存条件:-80℃

1.产品简介:

本产品是采用大肠杆菌E.coli Origami 2(DE3) 感受态细胞菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。Origami 2系列菌株是集合BL21TunerOrigami三种菌株的优点于一身,细胞质内生成二硫键,有助于含二硫键蛋白的活性蛋白形成。

基因型:Δ(ara-leu)7697 ΔlacX74 ΔphoA PvuII phoR araD139 ahpC galE galK rpsL F[lac+ lacIq pro] gor522::Tn10 trxB (StrR, TetR)

特点:1. Origami 2菌株包含突变的硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase(trxB) 和谷胱甘肽还原酶(glutathione reductase)(gor)基因,表达主要还原途径的两个关键酶。有利于形成正确折叠的含有二硫键的蛋白,增强蛋白的可溶性。2. Origami系列感受态相比,Origami 2系列感受态细胞是卡那敏感的,这使得该菌株适用范围更广。3. 亮氨酸生长缺陷型宿主菌。具链霉素,四环素抗性。pUC19质粒检测,转化效率可达107cfu/μg DNA

2.使用说明:

1.取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min

342℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。

4.每个离心管中加入450 μl无菌的SOCLB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床, 150 rpm振荡培养4560min使菌体复苏。

5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOCLB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养, 37℃培养12~16h

3.注意事项:

1.刚化冻的细胞转化效率*,避免反复化冻。

2.质粒质量和浓度等的差异会使转化效率有所下降。

*本试剂仅供实验室研究使用




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