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DH10B感受态细胞
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  • 发布日期: 2020-05-30
  • 更新日期: 2020-07-27
产品详细说明
用途范围: 纯度: %
CAS编号: 产地: 中国
品牌: Frdbio 规格: 100μl*10
货号: MCC0610 是否进口:

DH10B感受态细胞

产品编号

产品名称

规格

MCC0610

DH10B感受态细胞

100μl*10

pUC19control vector

10pg/μl10μl

保存条件:-80℃。

1.产品简介:

本产品是采用大肠杆菌DH10B菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,可提取高纯度DNA,适合于*富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA,可用于蓝、白斑筛选。

基因型:F- mcrA ?(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80lacZ?M15 ?lacX74 recA1 endA1 araD139 ?(ara, leu)7697 galE15 galK λ-rpsL nupG

特点:1. DH10B菌株来源于MC1061菌株,mcrAmcrBCmrr突变使之适合于*富含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的DNA 2. recA1endA1的突变有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。3.φ80lacZ?M15 marker的存在使DH10B可用于蓝、白斑筛选DH10B菌株。具链霉素抗性,pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg DNA

2.使用说明:

1.取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2.待感受态细胞融化后,加入适量目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),并用手拨打 EP 管底轻轻混匀,冰浴30min

342℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。

4.每个离心管中加入450 μl无菌的SOCLB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床, 150 rpm振荡培养4560min使菌体复苏。

5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOCLB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12~16h

3.注意事项:

1.感受态细胞*在冰上融化。

2.混入质粒或连接产物时应轻柔操作。

3.转化高浓度的质粒或高效率的连接产物可相应减少最终用于涂板的菌量。

*本试剂仅供实验室研究使用



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