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E.coli BL21(DE3)Condon Plus感受态细胞
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  • 发布日期: 2020-05-30
  • 更新日期: 2020-07-27
产品详细说明
用途范围: 纯度: %
CAS编号: 产地: 中国
品牌: Frdbio 规格: 100μl*10
货号: MCC0040 是否进口:

E.coli BL21(DE3)Condon Plus感受态细胞

产品编号

产品名称

规格

MCC0040

E.coli BL21Condon plus(DE3)感受态细胞

100μl*10

保存条件:-80℃

1.产品简介:

本产品是采用大肠杆菌E.coli BL21(DE3) Condon Plus感受态细胞菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。补充4种稀有密码子(AGAAUACCCCUA);提高富含AT- GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。

基因型:F–ompThsdS(rB–mB–)dcm+Tetrgalλ(DE3)endAHte[argUproLCamr][argUileYleuWStrep/Specr]

特点:1.来源于Stratagene公司的BL21-Gold菌株,缺少Lon蛋白酶和OmpT蛋白酶,从而减少对重组蛋白的降解,补充大肠杆菌缺乏的4种稀有密码子(AGAAUACCCCUA)对应的tRNAargUileYproLleuW),提高外源基因,尤其是富含AT-GC-的真核基因在原核系统中的表达水平。2.该菌株染色体整合了λ噬菌体DE3区(DE3区含有T7噬菌体RNA聚合酶),可同时表达T7RNA聚合酶和大肠杆菌RNA聚合酶,可用于pET系列,pGEXpMAL等质粒的蛋白表达。3.具四环素,氯霉素,链霉素,壮观霉素抗性。pUC19质粒检测,转化效率可达108cfu/μg DNA

2.使用说明:

1.取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min
3
42℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。
4
.每个离心管中加入450 μl无菌的SOCLB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床, 150 rpm振荡培养4560min使菌体复苏。
5
.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOCLB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养, 37℃培养12~16h

3.注意事项:

1.刚化冻的细胞转化效率*,避免反复化冻。

2.整个动作要轻柔。

3.质粒质量和浓度等的差异会使转化效率有所下降。

*本试剂仅供实验室研究使用



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