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JM110感受态细胞
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  • 发布日期: 2020-05-30
  • 更新日期: 2020-07-27
产品详细说明
用途范围: 纯度: %
CAS编号: 产地: 中国
品牌: Frdbio 规格: 100μl*10
货号: MCC0710 是否进口:

JM110感受态细胞

产品编号

产品名称

规格

MCC0710

JM110感受态细胞

100μl*10

保存条件:-80

1.产品简介:

本产品是采用大肠杆菌JM110菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,甲基化基因dam,dcm缺失菌株,只适用于质粒的转化,一般不用于质粒构建。

基因型:rpsL (Str R) thr leu thi-1 lacY galK galT ara tonA tsx dam dcm supE44 Δ(lac-proAB) /F[traD36 proAB lacIqlacZΔM15]

特点:1JM110 菌株具有硫酸链霉素抗性(StrR);是甲基化基因damdcm缺失的菌株,提取得到的质粒DNA,可被对damdcm甲基化敏感的内切酶切割2lacIqlacZΔM15的存在使JM110可以进行蓝白斑筛选,但转化效率不高。一般不用于质粒构建,只适用于质粒转化pUC19质粒检测,转化效率可达107 cfu/μgDNA

2.使用说明:

1.取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min

342热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。

4.每个离心管中加入450 μl无菌的SOCLB培养基(不含抗生素),混匀后置于37摇床, 150 rpm振荡培养4560min使菌体复苏。

5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOCLB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37直至液体被吸收,倒置培养, 37培养12~16h

3.注意事项:

1.刚化冻的细胞转化效率*,避免反复化冻。

2.整个动作要轻柔。

*本试剂仅供实验室研究使用



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