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JM109感受态细胞
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  • 发布日期: 2020-05-30
  • 更新日期: 2020-07-27
产品详细说明
品牌: Frdbio CAS编号:
产地: 中国 货号: MCC0410
纯度: % 用途范围:
规格: 100ul*10 是否进口:

JM109感受态细胞

产品编号

产品名称

规格

MCC0410

JM109感受态细胞

100μl*10

保存条件:-80

1.产品简介:

本产品是采用大肠杆菌JM109菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,提取高质量DNA的理想菌株,可用于构建*,蓝白斑筛选实验。

基因型:recA1, endA1, gyrA96, thi-1, hsdR17(rk - mk+ ), e14- (mcrA- ), supE44, relA1,Δ(lac-proAB)/F’[traD36,proAB+,lacIq,lacZΔM15]

特点:1JM109是一种琥珀抑制型F重组缺陷菌株,带有lacZΔM15,后者使得与在λZAP中编码的β-半乳糖苷酶氨基端进行α-互补,可用于蓝白斑筛选。2 recA1endA1的突变有利于*DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。3.支持M13噬菌体载体的生长,对转染的DNA有修饰作用,但无限制作用使用。pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg DNA,适用于高效的质粒DNA*并能保证高拷贝质粒的稳定复制。

2.使用说明:

1.取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min

342℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。

4.每个离心管中加入450 μl无菌的SOCLB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床, 150 rpm振荡培养4560min使菌体复苏。

5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOCLB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12~16h

3.注意事项:

1.刚化冻的细胞转化效率*,避免反复化冻。

2.整个动作要轻柔。

*本试剂仅供实验室研究使用



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