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E.coli top10感受态细胞
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  • 发布日期: 2020-05-30
  • 更新日期: 2020-07-27
产品详细说明
用途范围: 纯度: %
CAS编号: 产地: 中国
品牌: Frdbio 规格: 100μl*10
货号: MCC0110 是否进口:

E.coli Top10感受态细胞

产品编号

产品名称

规格

MCC0110

E.coli Top10感受态细胞

100μl*10

保存条件:-80℃。

1.产品简介:

本产品是采用大肠杆菌Top10感受态细胞菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞。常规实验室*比DH5α快,转化效率高,可用于蓝白斑筛选。

基因型:F- mcrA Δ(mrr-hsdRMS-mcrBC) φ80 lacZΔM15Δ lacX74 recA1 araΔ139Δ(ara-leu)7697 galUgalK rpsL (StrR) endA1 nupG

特点:1.TOP10菌株来源于MC1061菌株,是目前实验室最常用的感受态细胞之一,基因型与DH10B高度类似(DH10B  galE15 型,而 TOP10  galU 型)。2. 生长速度快(比 DH5α快,但比 Mach1-T1 生长速度慢),10 小时可见*3. recA1endA1的突变,有利于插入DNA的稳定和高纯度质粒DNA的提取。3.存在lacIqZΔM15基因使此菌株可以进行蓝白斑筛选。可用于构建*,蓝白斑筛选等实验,具链霉素抗性。pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg DNA

2.使用说明:

1 100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min
3
 42℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。
4
.每个离心管中加入450 μl无菌的SOCLB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150 rpm振荡培养4560min使菌体复苏。
5
 根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOCLB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12~16h

3.注意事项:

1. 刚化冻的细胞转化效率*,避免反复化冻。

2. 整个动作要轻柔。

*本试剂仅供实验室研究使用



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