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E.coli DH5α感受态细胞
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  • 发布日期: 2020-05-30
  • 更新日期: 2020-07-27
产品详细说明
用途范围: 纯度: %
CAS编号: 产地: 中国
品牌: Frdbio 规格: 100ul*10
货号: MCC0010 是否进口:

E.coli DH5α感受态细胞

产品编号

产品名称

规格

MCC0010

E.coli DH5α感受态细胞

100μl*20

保存条件:-80℃。

1.产品简介:

本产品是采用大肠杆菌E.coli DH5α菌株经特殊工艺处理得到的感受态细胞,实验室最常用的*感受态细胞,转化效率高,可用于蓝白斑筛选。

基因型:F-φ80 lac ZΔM15 Δ(lacZYA-arg F) U169 endA1 recA1 hsdR17(rk-,mk+) supE44λ- thi -1 gyrA96 relA1 phoA

特点:1DH5α菌株是实验室最常用的感受态细胞。缺失核酸内切酶(endA),提高了质粒 DNA 的产量和质量。2.重组酶缺陷型(recA)减少插入片段的同源重组概率,保证了插入DNA 的稳定性。3φ80lacZΔM15基因产物可与载体编码的

β-半乳糖苷酶氨基端实现α互补,可用于蓝白斑筛选。DH5α菌株的缺点是生长缓慢,37℃需培 12-14 小时才能看见*。pUC19质粒检测,转化效率可达108 cfu/μg DNA

2.使用说明:

1.取100 μl感受态细胞置于冰浴中融化。

2.待感受态细胞融化后,向感受态细胞悬液中加入目的DNA(根据实际情况加入适量的DNA,通常100 μl感受态细胞能够被1 ng超螺旋质粒DNA所饱和),用移液器轻轻吹打混匀,冰浴30min

342℃热击45sec,然后快速将离心管转移到冰浴中,冰上静置2-3min,该过程不要摇动离心管。

4.每个离心管中加入450 μl无菌的SOCLB培养基(不含抗生素),混匀后置于37℃摇床,150 rpm振荡培养4560min使菌体复苏。

5.根据实验需求,取适量已转化的感受态细胞,加到含相应抗生素的SOCLB固体琼脂培养基上,用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃直至液体被吸收,倒置培养,37℃培养12~16h

3.注意事项:

1.刚化冻的细胞转化效率*,避免反复化冻。

2.整个动作要轻柔。

*本试剂仅供实验室研究使用



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