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Frdbio Cy3荧光素标记试剂盒使用操作流程

 

Frdbio Cy3荧光素标记试剂盒使用操作流程如下:

1、试剂准备

待标记的生物分子与荧光素Z佳摩尔比例为 1:8-1:22,本试剂盒推荐Z佳比例为1:15; 为了获得Z佳的摩尔比例,可以要通过预实验进行摸索。以抗体标记为例,推荐量如下。Z佳标记体系应保证抗体的浓度为2mg/ml,标记时终浓度不低于1mg/ml。对于其他标记量,参照表按等比例调整抗体的体积和用量。

2、样品准备

待标记的分子浓度不低于2 mg/ml,如果浓度较低,需在实验之前浓缩到2mg/ml以上;待标记的分子需要溶解在符合以下要求的缓冲液中,如果符合以下要求可以直接进行标记,如果不符合请将溶液置换(透析或者超滤)到符合要求的溶液中在进行标记实验。

3、操作流程(以标记500ug抗体为例,2mg/ml)

1)取5 μl Frdbio?Cy3标记缓冲液,加入到上述准备好的待标记抗体溶液中,用移液器轻轻混匀

2)打开活化的Frdbio? Cy3溶液盖子,取2.5 μl加入到步骤1的溶液中,去离子水补足到50 μl,轻轻混匀,37°C 避光反应1小时。

3)反应完毕,将适量的PBS(约450 uL)加入到步骤2的混合溶液中,轻轻混匀并将溶液移至超滤管,4°C 12000离心10min。

4)将超滤管芯内溶液轻轻混匀并吹打管心内壁,并转移到一干净离心管中即为荧光素标记产物。

4、标记产物的保存

根据实验需要调整到合适的浓度,可加入适量BSA,甘油及防腐剂等,分装成小分-20°C避光保存。

更多相关信息请访问:http://www.frdbio.com/

 


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